生命科学原料
T4 Polynucleotide Kinase(10 U/μL)
| 货号 | 规格 | 目录价（元） |
|---|---|---|
| LS-EZ-E-00015O | 200 μL | 198 |
| LS-EZ-E-00015P | 4 mL | 3168 |
| LS-EZ-E-00015Q | 10 mL | 6930 |
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产品描述
T4 Polynucleotide Kinase（T4 PNK），中文名称T4多聚核苷酸激酶，是一种多聚核苷酸5'羟基激酶，可以催化ATP的 γ 位磷酸基团向单链或双链 DNA、RNA、寡核苷酸或带有 3' 磷酸基团的单核苷酸的5'羟基转移。本品可广泛用于寡核苷酸、DNA或RNA的 5'末端磷酸化、DNA或RNA的末端标记等实验。
产品应用
适用于DNA文库的构建以及末端标记制作探针
适用于寡核苷酸、DNA或RNA的 5'末端磷酸化
产品特点
纯度高
无批间差
活性好
核酸酶残留低
产品参数
| 分子量 | 48 kDa |
| 浓度¹ | 10 U/μL |
| 酶储存液 | 10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 µM ATP，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% glycerol, pH7.4 @ 25 ℃ |
| 储存温度 | -20 ℃保存，避免反复冻融 |
| 保质期 | 24个月 |
| 运输条件 | 干冰运输 |
¹活性定义：在37℃，30min条件下，将转移ATP上1 nmol γ- 磷酸基团转移到DNA 5'-OH末端所需的酶量定义为1个活性单位。
产品组分
| 组分名称 | LS-EZ-E-00015O | LS-EZ-E-00015P | LS-EZ-E-00015Q | 储存条件 |
|---|---|---|---|---|
| T4 PNK | 200 μL×1支 | 4 mL×1支 | 10 mL×1支 | -20℃储存 |
| 10× PNK Reaction Buffer | 1 mL×1支 | 10 mL×2支 | 50 mL×1瓶 | -20℃储存 |
保存条件及运输条件、有效期
干冰运输，-20℃保存，避免反复冻融；有效期24个月。
实验案例
1.用于测序文库构建
对打断双选后的炎黄gDNA进行末端修复-加A-接头连接-PCR富集，其中末端修复中的磷酸化酶使用竞品T4 PNK及新一产T4 PNK，其余物料均一致。接头连接产物及PCR富集后的产物分别进行定量，并将建库产物在BGI-Seq500进行上机测试， 结果显示新一产T4 PNK与竞品酶效果相当。
2.BGISEQ-500平台测序文库构建
将50ng炎黄gDNA打断后，使用竞品酶及新一产T4 PNK进行PE100 PCR-Free文库构建，构建的文库进一步在BGISEQ-500测序平台上进行PE100测试，测序结果显示新一产T4 PNK与竞品酶性能相当，适用于测序文库的构建。