生命科学原料
T4 DNA Ligase
| 货号 | 规格 | 目录价（元） |
|---|---|---|
| LS-EZ-E-00008O | 600 KU | Inquire |
| LS-EZ-E-00008L | 6,000 KU | Inquire |
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产品描述
本产品是一种高效的DNA连接酶，可催化双链DNA或RNA 平末端或粘性末端相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键 ，还可以修复双链 DNA 、RNA或DNA/RNA杂交链中的单链切刻，但不能催化单链核苷酸的连接。
产品应用
适用于TA克隆；dsDNA切刻修复;RNA和DNA的连接；文库构建、高通量测序等核酸操作。
产品特点
超高连接效率：连接效率好，可提高接头利用率。
快速反应：TA连接最快可10 min，缩短建库时间。
高性价比：微量使用同等效果，可满足降本增效需求。
产品参数
| 产品名称 | T4 DNA Ligase |
| 分子量 | 58 kDa |
| 浓度 | 600 U/μL |
| 酶储存液 | 10 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25℃) , 50 mM KCl , 0. 1 mM EDTA, 50% Glycerol, 200 μg/mL BSA, 1 mM DTT |
| 储存温度 | -20℃，避免反复冻融 |
| 保质期 | 24个月 |
| 运输条件 | 干冰运输 |
活性定义：1单位连接酶为在23℃ 、30 min条件下，20 μL 1×Ligation Buffer反应体系中，将具有粘性末端的 0.12 pmol DNA片段连接至50%所需的酶量。
产品组分
| 组分名称 | LS-EZ-E-00008O | LS-EZ-E-00008L | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| T4 DNA Ligase (600 U/µL) | 1 mL | 10 mL | -20℃储存 |
| 10× Ligation Buffer | 3 mL | 3 mL×10 | -20℃储存 |
保存条件及运输条件、有效期
干冰运输。-20℃保存，避免反复冻融。有效期24个月。
实验案例
T4 DNA 连接酶应用于片段连接
配制连接反应体系，加入T4 DNA连接酶，震荡混匀，室温（25℃）温浴20 min后进行琼脂糖凝胶电泳鉴定，结果表明，几乎所有底物均转化为产物。连接产物可用于后续PCR或高通量测序的文库构建。
应用于炎黄gDNA建库上机测试
利用炎黄gDNA 50 ng按照Fast One Tube建库方案建库，建库过程采用本T4 DNA连接酶 ，使用MGI高通量测序平台进行测序并完成数据分析。结果表明，新一产T4 DNA连接酶下机数据性能参数与商品酶无显著差异，测序质量优于商品酶。