生命科学原料
Klenow Fragment
| 货号 | 规格 | 目录价（元） |
|---|---|---|
| LS-EZ-E-00013O | 1000 U | Inquire |
| LS-EZ-E-00013P | 5000 U | Inquire |
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产品描述
Klenow Fragment是来源于大肠杆菌PolA家族的一种常温 DNA聚合酶，沿5´→3´方向催化与模板互补DNA的合成， 同时还具有3´→5´外切校正活性。
产品应用
适用于平末端生成、cDNA第二链合成、探针制备、文库构建、高通量测序等核酸操作。
产品特点
纯度高
活性好
批间稳定性好
无偏好性
产品参数
| 产品名称 | Klenow Fragment |
| 分子量 | 70.6 kDa |
| 浓度 | 5 U/μL |
| 酶储存液 | 25 mM Tris-HCl(pH7.4 @ 25℃) ，0.1 mM EDTA ，1 mM DTT ，50% Glycerol |
| 储存温度 | -20℃，避免反复冻融 |
| 保质期 | 24个月 |
| 运输条件 | 干冰运输 |
活性定义：37 ℃、30 min条件下，在25 μL的 1× Klenow Reaction Buffer 反应体系中，聚合10 nmol dNTPs所需的酶量定义为1个活性单位。
产品组分
| 组分名称 | LS-EZ-E-00013O | LS-EZ-E-00013P | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| Klenow Fragment(5 U/µL) | 200 μL | 1 mL | -20℃储存 |
| 10× Klenow Reaction Buffer | 1 mL | 1 mL×5 | -20℃储存 |
保存条件及运输条件、有效期
干冰运输。-20℃保存，避免反复冻融。有效期24个月。
实验案例
聚合活性测试
使用不同批次Klenow Fragment和竞品酶进行聚合活性测试。三个不同批次Klenow Fragment的聚合产物产量较为一致，与竞品酶无明显差异。
外切活性测试
使用不同批次Klenow Fragment和竞品酶在无dNTP体系下进行外切活性测试。三个不同批次Klenow Fragment反应后的底物剩余量与竞品酶无明显差异，均低于50%，其外切活性较为一致。
应用于测序文库构建
将不同批次Klenow Fragment和竞品酶应用于BGISEQ-500平台建库中的末端修复环节，对50 ng E.coli gDNA末端修复-接头连接后产物及PCR产物进行定量分析，本品与竞品无明显差异。