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生命科学原料

Transposase

货号 规格 目录价(元)
LS-EZ-E-00009O 200 U Inquire
LS-EZ-E-00009P 1,000 U Inquire

*具体价格咨询当地业务员

产品描述

本Transposase是野生型转座酶的高活性突变体,可以高效的将转座子插入到任意靶DNA中。在转座反应中,转座酶通过识别一段19 bp的DNA序列(ME),与之形成Tn5-ME复合体(Transposome),进而随机在靶DNA上切开磷酸二酯键,催化ME末端3´-OH与靶DNA游离的5´-磷酸基团形成共价连接,使外源的ME序列整合到靶DNA序列上。转座酶的插入位点具有很高的随机性。

产品应用

体外转基因(外源基因整合到宿主细胞)
建立蛋白质随机插入、缺失、突变文库
测序建库

产品特点

高效稳定
应用广泛

产品参数

产品名称 Transposase
分子量 53.3 kDa
浓度* 1 U/μL
酶储存液 50 mM HEPES-KOH (pH 7.2 @ 25 ℃), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% Triton X-100, 55% Glycerol
储存温度** -20 ℃,避免反复冻融
保质期 12个月
运输条件 干冰运输

*活性定义:1单位转座酶在1×TAG Buffer中55 ℃反应10 min ,可将100 ng线性DNA片段(1.7 kb)完全打断。

**产品融解后请于-20±5 ℃保存,并于3个月之内包埋接头。

产品组分

组分名称 LS-EZ-E-00009O LS-EZ-E-00009P 储存条件
Transposase (1 U/µL) 200 μL 1 mL -80 ℃储存
5×TAG Buffer 1 mL 10 mL -20 ℃储存
5×NT Buffer 1 mL 10 mL 常温储存

保存条件及运输条件、有效期

干冰运输。Transposase在-80 ℃保存,包埋接头后可于-20 ℃保存,避免反复冻融。有效期12个月。

实验案例

在高通量测序文库构建中使用

实验采用相同的文库构建流程,使用不同批次的转座酶并进行3个重复;结果显示使用新一产转座酶构建的文库均一性较高,主带分布在200-400 bp。

单细胞多组学分析

转座酶应用在scCAT-Seq实验中,可在打断DNA后将测序引物同时插入到开放染色质位点中。如图所示,利用新一产转座酶可获得高质量的测序数据。 左图为转录起始位点(Transcription start site , TSS)染色质可及性富集效果图;右图为转录组区域覆盖一致性效果图。