生命科学原料
Transposase
| 货号 | 规格 | 目录价（元） |
|---|---|---|
| LS-EZ-E-00009O | 200 U | Inquire |
| LS-EZ-E-00009P | 1,000 U | Inquire |
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产品描述
本 Transposase 是野生型转座酶的高活性突变体，可以高效的将转座子插入到任意靶 DNA 中。在转座反应中，转座酶通过识别一段19 bp的DNA序列(ME) ，与之形成 Tn5- ME 复合体 (Transposome) ，进而随机在靶 DNA 上切开磷酸二酯键，催化 ME 末端 3´-OH 与靶 DNA 游离的 5´-磷酸基团 形成共价连接，使外源的 ME 序列整合到靶 DNA 序列上。转座酶的插入位点具有很高的随机性。
产品应用
体外转基因 (外源基因整合到宿主细胞)
建立蛋白质随机插入、缺失、突变文库
测序建库
产品特点
高效稳定
应用广泛
产品参数
| 产品名称 | Transposase |
| 分子量 | 53.3 kDa |
| 浓度¹ | 1 U/μL |
| 酶储存液 | 50 mM HEPES-KOH (pH 7.2 @25C),100 mM NaCl ,0.1 mM EDTA ,1 mM DTT,0. 1% Triton X- 100,55% Glycerol |
| 储存温度² | -20℃，避免反复冻融 |
| 保质期 | 12个月 |
| 运输条件 | 干冰运输 |
¹活性定义：1单位转座酶在1× TAG Buffer中55℃反应10 min ，可将100 ng线性DNA片段 (1.7 kb)完全打断。
²产品融解后请于-20± 5℃保存，并于 3 个月之内包埋接头。
产品组分
| 组分名称 | LS-EZ-E-00009O | LS-EZ-E-00009P | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| Transposase(1 U/µL) | 200 μL | 1 mL | -80℃储存 |
| 5× TAG Buffer | 1 mL | 10 mL | -20℃储存 |
| 5× NT Buffer | 1 mL | 10 mL | 常温储存 |
保存条件及运输条件、有效期
干冰运输。Transposase在-80℃保存，包埋接头后可于-20℃保存,避免反复冻融。有效期12个月。
实验案例
在高通量测序文库构建中使用
实验采用相同的文库构建流程,，使用不同批次的转座酶并进行3个重复；结果显示使用新一产转座酶构建的文库均一性较高,主带分布在200-400 bp。
单细胞多组学分析
转座酶应用在scCAT-Seq实验中，可在打断DNA后将测序引物同时插入到开放染色质位点中。如图所示，利用新一产转座酶可获得高质量的测序数据[左图为转录起始位点(Transcription start site , TSS)染色质可及性富集效果图；右图为转录组区域覆盖一致性效果图]。